高壓滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內(nèi),通過加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱,此時由于蒸氣不能溢出,而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓力,從而使沸點增高,得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。 在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時,滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否*極為重要,因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓,所以,當(dāng)水蒸汽中含有空氣時,在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。 所以飽和蒸汽的滅菌更*!
一、高壓滅菌鍋使用前要水加到水位線;
二、將需滅菌的培養(yǎng)基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內(nèi),關(guān)閉鍋蓋,檢查排氣閥、安全閥狀態(tài)(上下排氣閥打開安全閥關(guān)合然后加熱,方便空氣排出,上、下排氣閥都同時處于開啟狀態(tài)待有水蒸汽從上、下閥溢出,此狀態(tài)保持7、8分鐘后,即排出空氣后 上排氣閥關(guān)合 下排氣閥調(diào)小 安全閥保持關(guān)合狀態(tài) ),
三、打開電源,檢查參數(shù)設(shè)置是否正確,然后按下“work”鍵,滅菌鍋開始工作;自動派冷氣,到105℃時,底部排氣閥門自動關(guān)閉,然后壓力開始上升;
四、壓力升至 0.15MPa(121℃)時,滅菌鍋再次自動放氣,然后開始記時,一般培養(yǎng)基滅菌20min,蒸餾水滅菌30min;
五、達(dá)到規(guī)定的滅菌時間后,關(guān)閉電源,打開放氣閥緩慢放氣;當(dāng)壓力指針降至 0.00MPa時,放氣閥無蒸汽排除時,方可開啟鍋蓋。
六、注意事項
1、汽未放盡前,不得開啟高壓鍋;
2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時拿出,需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開,切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過夜。
3、壓力表指針在0.05MPa以上時,不能過快放汽,以防止壓力急速下降,液體滾沸,從培養(yǎng)容器中溢出。
4、操作過程,請注意安全,小心燙傷。
在一個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下水的沸點是100攝氏度 壓力越高,與之對應(yīng)壓力下的沸點越高 這里是高壓蒸汽鍋,說明壓力肯定大于一個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓(通常情況下的地表面的大氣壓強就認(rèn)為是一個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓),也就是說高壓蒸汽鍋肯定要超過100攝氏度才能沸騰,才能產(chǎn)生蒸汽. 至少要等到水煮沸,排出一分鐘左右的蒸汽后再把安全閥關(guān)閉,這樣可以使高壓蒸汽鍋里的壓力迅速上升,原來沸騰的水因為壓力的快速上升而停止沸騰,壓力大,沸點高,水蒸汽就變成液體水,而放出大量的汽化潛熱,就是高溫高壓的目的,從而達(dá)到殺菌的目的 原理在同一溫度下,濕熱的殺菌效力比干熱大,其原因有三:
一是濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分,蛋白質(zhì)較易凝固,因蛋白質(zhì)含水量增加,所需凝固溫度降低,
二是濕熱的穿透力比干熱大;
三是濕熱的蒸汽有潛熱存在,每1克水在100℃時,由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時可放出2.26kJ(千焦)的熱量。這種潛熱,能迅速提高被滅菌物體的溫度,從而增加滅菌效力。
在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時,滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否*極為重要,因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓,所以,當(dāng)水蒸汽中含有空氣時,在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。 如果壓力未降到0時,打開排氣閥,就會因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。 要100度以上,也就是對應(yīng)壓力下的沸點后才能使水劇烈沸騰,將鍋內(nèi)空氣更多的排除.