雖然PCR儀器不是一種計(jì)量儀器,但其主要作用原理與基本計(jì)量要素密切相關(guān),要求較高,一旦失控,儀器將不能正常工作,所以PCR儀器也需要定期檢測和維護(hù),這對依賴自然風(fēng)降溫的PCR儀器尤為重要。
在儀器的維護(hù)保養(yǎng)中,需要注意以下問題:
1)PCR儀器需要定期檢測,視制冷方式而定一般半年至少一次。
2)PCR反應(yīng)的要求溫度與實(shí)際分布的反應(yīng)溫度是不一致的,當(dāng)檢測發(fā)現(xiàn)各孔平均溫度差偏離設(shè)置溫度大于1~2℃時,可以運(yùn)用溫度修正法糾正PCR實(shí)際反應(yīng)溫度差。
3)PCR反應(yīng)過程的關(guān)鍵是升、降溫過程的時間控制,要求越短越好,當(dāng)PCR儀的降溫過程超過60s,就應(yīng)該檢查儀器的制冷系統(tǒng),對風(fēng)冷制冷的PCR儀要較*地清理反應(yīng)底座的灰塵;對其他制冷系統(tǒng)應(yīng)檢查相關(guān)的制冷部件。
4)一般情況如能采用溫度修正法糾正儀器的溫度時,不要輕易打開或調(diào)整儀器的電子控制部件,必要時要請專業(yè)人員修理或利用儀器電子線路詳細(xì)圖紙進(jìn)行維修。
下面介紹一些具體的保養(yǎng)維護(hù)方法:
1.樣品池的清洗
先打開蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體;打開PCR儀,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運(yùn)行,讓殘余液體揮發(fā)去除。一般5~10min即可。
2.熱蓋的清洗
對于熒光定量PCR儀,當(dāng)有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來自樣品池時,或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無污物阻擋光路。
3.儀器外表面的清洗
清洗儀器的外表面可以除去灰塵和油脂,但達(dá)不到消毒的效果。選擇沒有腐蝕性的清洗劑對PCR儀的外表面進(jìn)行清洗。
4.更換保險絲
先將PCR儀關(guān)機(jī),拔去插頭,打開電源插口旁邊的保險盒,換上備用的保險絲,觀察是否恢復(fù)正常。