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降鈣素(CT)ELISA 試劑盒
間接法常用于檢測(cè)抗體,一般的操作步驟為:
將已知的抗原固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余的抗原。
加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的一次抗體,則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗原進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)。
洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測(cè)的一次抗體鍵結(jié)。
洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤(pán)中的吸光值(OD值),以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。
降鈣素(CT)ELISA 試劑盒
競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,一般用于檢測(cè)小分子抗原,其操作步驟為:
將具有專(zhuān)一性的抗體固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗體
加入待測(cè)檢體,使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)
加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤(pán)上固著的抗體數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤(pán)上抗體鍵結(jié),即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來(lái)。
洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤(pán)內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。
當(dāng)需要偵測(cè)無(wú)法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤(pán)上時(shí),一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。
需要而未提供的試劑和器材
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 精密移液器及一次性吸頭
4. 蒸餾水,
5. 一次性試管
6. 吸水紙
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