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γ-氨基丁酸(GABA) ELISA 試劑盒
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個(gè)分子由4個(gè)亞基組成,可以和4個(gè)生物素分子親密結(jié)合。維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學(xué)方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強(qiáng),親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)生物素分子的結(jié)合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來(lái),就可大提高ELISA的敏感度。
親和素-生物素系統(tǒng)在ELISA中的應(yīng)用有多種形式,可用于間接包被,亦可用于終反應(yīng)放大??梢栽诠滔嗌舷阮A(yù)包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結(jié)合,通過(guò)親和素-生物素反應(yīng)而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結(jié)合點(diǎn)充分暴露。另外,在常規(guī)ELISA中的酶標(biāo)抗體也可用生物素化的抗體替代,然后連接親和素-酶結(jié)合物,以放大反應(yīng)信號(hào)。
γ-氨基丁酸(GABA) ELISA 試劑盒
親和素是一種糖蛋白,一分子親和素可以與四個(gè)生物素小分子發(fā)生專一親和作用,類似抗原與抗體親和。它們之間的作用力是目前已知強(qiáng)的非共價(jià)作用。80年代后,隨著生物素-親合素系統(tǒng)(BAS)作用被發(fā)現(xiàn),這一親和作用被結(jié)合應(yīng)用到ELISA技術(shù)上,大大提高了后者反應(yīng)的靈敏性與專一性。生物素很易與蛋白質(zhì)(如抗體等)以共價(jià)鍵結(jié)合。這樣,結(jié)合了酶的親和素分子與結(jié)合有特異性抗體的生物素分子產(chǎn)生反應(yīng),既起到了多級(jí)放大作用,又由于酶在遇到相應(yīng)底物時(shí)的催化作用而呈色,達(dá)到檢測(cè)未知抗原(或抗體)分子的目的。
γ-氨基丁酸(GABA) ELISA 試劑盒
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