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血管生成素(ANG)ELISA 試劑盒
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個(gè)分子由4個(gè)亞基組成,可以和4個(gè)生物素分子親密結(jié)合。維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學(xué)方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類(lèi)和酶等多種類(lèi)型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強(qiáng),親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)生物素分子的結(jié)合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類(lèi)似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來(lái),就可大提高ELISA的敏感度。
親和素-生物素系統(tǒng)在ELISA中的應(yīng)用有多種形式,可用于間接包被,亦可用于終反應(yīng)放大。可以在固相上先預(yù)包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結(jié)合,通過(guò)親和素-生物素反應(yīng)而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結(jié)合點(diǎn)充分暴露。另外,在常規(guī)ELISA中的酶標(biāo)抗體也可用生物素化的抗體替代,然后連接親和素-酶結(jié)合物,以放大反應(yīng)信號(hào)。
血管生成素(ANG)ELISA 試劑盒
需要而未提供的試劑和器材
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 精密移液器及一次性吸頭
4. 蒸餾水,
5. 一次性試管
6. 吸水紙
注意事項(xiàng)
1. 從2-8℃取出的試劑盒,在開(kāi)啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差
3. 建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測(cè)。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
5. 為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
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