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酪氨酸羥化酶(TH)ELISA 試劑盒
間接法常用于檢測(cè)抗體,一般的操作步驟為:
將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的一次抗體,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)。
洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測(cè)的一次抗體鍵結(jié)。
洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。
在臨床檢驗(yàn)中一般采用商品試劑盒進(jìn)行測(cè)定。ELISA中有三個(gè)必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
工作原理
酪氨酸羥化酶(TH)ELISA 試劑盒
本試劑盒采用雙位點(diǎn)夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),測(cè)定樣品中的水平。向預(yù)先包被抗體的酶標(biāo)孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和HRP標(biāo)記的抗體,經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的組分,然后再加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中的濃度呈正相關(guān)。
⑴已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
⑵酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
⑶酶的底物;
⑷陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
⑸酶聯(lián)物(結(jié)合物)及標(biāo)本的稀釋液;
⑹洗滌液;
⑺酶反應(yīng)終止液。
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